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世界实时:人蛋白C(HCPC-0070)解决方案

人蛋白C背景:


(资料图)

维生素K依赖性酶原C蛋白在肝脏中合成为单链多肽,随后通过从前体分子。在血浆中观察到痕量的单链形式。轻链负责蛋白C与磷脂囊泡的钙依赖性结合,包含11个g-羧基谷氨酸(gla)残基、1个b-羟基天冬氨酸残基和2个表皮生长因子(EGF)同源结构域。丝氨酸催化三联体位于重链中,已鉴定出其中的2种形式。形式“a”和“b”已显示存在一个糖基化位点的差异,但未观察到“a”和“b”之间的功能区别。人C蛋白重链Arg-12(牛中的Arg-14)的单次切割将酶原转化为丝氨酸蛋白酶,活化的C蛋白。这种切割由α-凝血酶和内皮细胞表面之间的复合物催化 蛋白凝血调节蛋白。与其他维生素K依赖性凝血因子不同,活化蛋白通过催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起到抗凝血剂的作用。APC还通过与纤溶酶原激活剂抑制剂形成复合物来促进纤维蛋白溶解反应。牛蛋白C是通过修改Walker程序从新鲜的柠檬酸盐牛血浆制备的,如Haley等人所述使用常规层析技术从新鲜冷冻的柠檬酸盐血浆中制备小鼠蛋白C。使用免疫亲和层析和常规技术的组合从新鲜冷冻的柠檬酸盐人血浆中制备人蛋白C。蛋白C以50%(体积/体积)甘油/水的形式提供,应储存在-20°C下。通过SDS-PAGE分析确定纯度,并使用基于显色底物的测定法测量活性。

人蛋白C#HCPC-0070参数:

本地化:等离子

血浆浓度:4-5µg/ml(人)(6)

5-10µg/ml(牛)(2)

作用方式:Zymogen;丝氨酸蛋白酶激活蛋白的前体

C(APC)

分子量:62000(人)(7)

5.8万(牛)(7)

62000(鼠)-根据人类价值推断

消光系数:E1 cm,280 nm=14.5(人)(7)

=13.7(牛)(7)

=14.5(鼠)-根据人类价值推断

等电点:4.4-4.8(人)(8)

4.2-4.5(牛)(8)

结构:两条链,Mr=4100和21000,二硫键连接,

NH2-末端gla结构域两个EGF结构域

碳水化合物百分比:23%(人体)(7)

14%(牛)(7)

翻译后修饰:11个gla残基(牛),

一种β-羟基天冬氨酸

人蛋白C文献参考:

1 . Esmon, C .T ., Progress in Thromb . and Hemostas ., 10, 25 (1984) .

2 . Stenflo, J ., Semin . in Thromb . and Hemostas ., 10, 109 (1984) .

3 . Walker, F .J ., et al., Biochim . Biophys . Acta, 571, 333 (1979) .

4 . Haley, P .E ., et al., J . Biol . Chem ., 264, 16303 (1989) .

5 . Jenny, R .J ., et al., Prep . Biochem ., 16, 227 (1986) .

6 . Griffen, J .H ., et al.,Blood, 60, 261 (1982) .

7 . Kisiel, W ., et al., Methods Enzymol ., 80, 320 (1981) .

8 . Discipio, R .G ., et al., Biochemistry, 18, 899 (1979) .

9 . Bajaj, S .P ., et al., Prep . Biochem ., 11, 397 (1981) .

10 . Kalafatis, M . et al., J . Biol . Chem ., 291, 1578 (2016)

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